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REACTIVO DE COOMBS POLIESPECIFICO
REACTIVO DE COOMBS MONOESPECIFICO ANTI-IgG
REACTIVO DE COOMBS MONOESPECIFICO ANTI-C3d


Campo de aplicación

* Detección de anticuerpos irregulares en suero humano a través de la Prueba Indirecta de Coombs (PIC) .
* Detección de IgG y/o complemento sobre hematíes humanos a través de la Prueba Directa de Coombs (PDC), en pacientes ó donantes de sangre.
* Determinación de grupos sanguíneos con antisueros previstos para la prueba de Coombs.

Modo de empleo:

Prueba Directa de Coombs.

* Lavar 4 veces una suspensión de los hematíes problema con abundante solución salina fisiológica (SSF) ó solución salina tamponada (PBS). Cada vez la cantidad de solución lavadora debe ser, al menos cien veces el volumen de hematíes a procesar.
* Resuspender los hematíes al 3% en SSF ó PBS.
* En un tubo de ensayos añadir dos gotas (100 ?) de reactivo de Coombs a 1 gota (50 Ml) de hematíes al 3%.
* Centrifugar inmediatamente a 300g (estandarice su centrífuga).
* Leer a contraluz microscópicamente, y microscópicamente si resulta aparentemente negativo.
* Añadir una gota de hematíes control de Coombs a toda prueba con resultados negativos, centrifugar nuevamente y efectuar la lectura. Esta debe ser francamente positiva.

Prueba Indirecta de Coombs.

* Lavar, al menos una vez los hematíes de la sangre a transfundir si se trata de una prueba cruzada mayor. Para esto tomar una pizca de sangre de la bolsa (trozo de manguera piloto) en un tubo de ensayo, lavar y resuspender al 3%. Si se trata de un rastreo de anticuerpos tratar los hematíes de prueba según las indicaciones del proveedor.
* En un tubo de ensayos mezclar una gota de la suspensión de hematíes con el suero problema.
* Incubar al menos 30 min., preferiblemente 1 hora. El tiempo de incubación puede ser reducido si se emplea solución potenciadora. En tal caso siga las instrucciones del proveedor.
* Lavar 4 veces el botón de hematíes con abundante SSF ó PBS.
* Añadir dos gotas (100 ?) de reactivo de Coombs y centrifugar inmediatamente a 120g.
* Efectuar la lectura microscópicamente a contraluz ó microscópicamente si resulta aparentemente negativa.
* Añadir una gota de hematíes control de Coombs a toda prueba con resultados negativos, centrifugar nuevamente y efectuar la lectura. Esta debe ser francamente positiva.

Uso de los reactivos monoespecíficos

Aplicar empleando los mismos métodos solo en caso de positividad con el reactivo poliespecífico. Es de especial utilidad para un diagnóstico adecuado de las anemias hemolíticas autoinmunes.

Principales causas de error.

* ´Tubo sucio´: Se inactiva el reactivo de Coombs con restos de suero humano ó suciedad por insuficiente lavado. Es común en algunos laboratorios no enjuagar bien con agua destilada antes del secado del material reutilizable. Lo mejor es el uso de material desechable, siempre que sea posible.
* Insuficiente lavado de los hematíes del paciente en la PDC ó de los hematíes de prueba después de la incubación con el suero problema.
* Insuficiente tiempo de incubación de la mezcla suero-hematíes.
* Reacción muy débil frente a anticuerpos ó antígenos muy débiles. El botón de hematíes para la lectura debe manipularse con delicadeza.
* Es muy aconsejable el empleo de hematíes ´control de Coombs´ en toda prueba que resulte negativa. Cada estudio debe acompañarse de los correspondientes ensayos positivos y negativos de manera que los resultados puedan ser evaluados correctamente.